查找:                      转第 显示法宝之窗 隐藏相关资料 下载下载 收藏收藏 打印打印 转发转发 小字 小字 大字 大字
【期刊名称】 《中国司法鉴定》
接触性DNA检验现状与展望
【英文标题】 Advances in Touch DNA Testing【作者】 吴婷牛青山王金换温文娇
【作者单位】 湖南警察学院中国刑警学院中国刑警学院中国刑警学院
【中文关键词】 法医遗传学;接触性DNA; 微量物证;DNA提取;PCR; STR分型
【英文关键词】 forensic genetics; touch DNA; trace biological evidence; DNA extraction; PCR; STR genotype
【文章编码】 1671-2072-(2016)05-0066-05
【文献标识码】 A doi:10.3969/j.issn.1671-2072.2016.05.011
【期刊年份】 2016年【期号】 5
【页码】 66
【摘要】 随着犯罪嫌疑人的反侦查意识及能力加强,接触性检材在现场提取检材中所占的比重越来越大,现场接触性DNA在案件侦破中发挥的作用也日渐明显。由于人在接触物体后,会在物体表面留下相应的微量接触性DNA,对这类接触性检材的检验分析是目前法医物证检验工作的热点和难点。对接触性检材的现场发现、前期处理及DNA的提取方法、扩增方法、电泳以及结果分析等方面对其检验研究进展综述。希望能够为侦查实战工作在接触类检材的现场发现,提取以及成功检测分型方面提供方法和思路。展望:首先,关于接触性检材的分类按接触物体表面质地分更为合理,因为潜在DNA转移的发生,与物体表面质地及样本的湿度密切相关,而且检材的表面质地很大程度上影响实验者提取方法的选择;其次,现勘人员应该及时出现场并且能结合案情科学地提取、包装并运送检材;再次,我们在处理接触类检材必须做到检验时突出重点部位、选择合适的检验策略与方案;最后,根据接触性检材的检测结果下鉴定意见时应十分谨慎。
【英文摘要】 With the increasing counter-investigation awareness and capacity of criminals, touch DNA has larger proportion in the samples collected at crime scenes, and is gradually playing a more obvious role in solving cases. People leave trace DNA on the surface when they touch an object.The touch DNA testing is the focus and difficulty of forensic biology research. The authors review the studies of touch DNA in the following aspects: the discovery and dispose of contact samples on the scene, the method for DNA extraction and amplification, electrophoresis, and analysis methods. Moreover, the authors rasies their own opinions: First, it is more reasonable to classify the touch DNA by the surface texture of the objects, not only because the transfer of potential DNA is closely related to the material quality and the humidity of samples, but also because the material quality greatly affects the choice of extraction methods. Secondly, the investigators should arrive at the crime scene in time, and collect, pack and submit the samples scientifically under specific conditions. Thirdly, the analysts must know the key parts in examination, and choose appropriate analyzing methods. Lastly, the conclusions drawn from the testing result of touch DNA should be very cautious.
【全文】法宝引证码CLI.A.1216823    
  
  当前,犯罪嫌疑人的反侦查意识及能力加强,现场接触性检材易被犯罪嫌疑人忽视而遗留在案发现场,故此类接触性检材的DNA检测在案件侦破中发挥的作用也日渐明显。接触性DNA(Touch DNA)是指人体皮肤脱落的上皮细胞通过皮肤接触而遗留在客体表面的DNA{1}。1997年,Van等{2}在Nature上首次报道,能从与人体短暂接触的物体表面,如:钢笔、车钥匙、乳胶手套内侧、衣柜把手、公文包提手、电话听筒、刀柄等提取到接触者DNA,并获得完整的STR图谱。 Wickenheiser{3}报道,人每天自然脱落约40万个上皮细胞,成为接触性DNA的主要来源。李军等{4}认为大量的脱落细胞,可以分为口腔黏膜脱落细胞和体表皮肤脱落细胞两类。 Daniel等{5}认为游离DNA(cell-free nucleic acids)也是接触性DNA的组成成分。
  接触DNA虽然微量但是侧重于DNA的来源,因此并不等同于微量DNA(traceDNA、LCN或Lt DNA)。 Gill等{6}认为微量DNA的模板量小于100pg; Caddy等{7}认为界定微量DNA模板量的标准为200 pg; 而Budowle等{8}报道由于DNA定量方法有差异,LCN分型应定义为正常阈值之下的分析结果;Gill等{9}后来发表类似于Budowle的观点。由于在实际刑事案件中接触性DNA的样本原始情况脆弱且DNA含量很少,对这类样本进行STR分型时仍需遵循微量DNA的分析方法。
  1接触性DNA检验的研究现状
  1.1接触性DNA检材的现场发现
  在案发现场,接触性检材与常规生物检材如血痕、精斑相比,肉眼观察很难判断脱落细胞是否存在及其在载体上的具体部位、数量的多少。杨电等{10}研究表明用于指纹显现的茚三酮薰显技术可用于指导案件中人体脱落细胞的发现采集。而作为法医现勘必备的多普勒光源,蔡能斌等{11}报道经波长为266 nm的紫外光照射后,会严重影响指纹脱落细胞的DNA检验,但对血迹、唾液斑、有毛囊的毛发的DNA检验影响较小。因此在现场勘查寻找发现接触性检材过程中应慎用紫外激光。张天祥等{12}报道了现场生物物证发现的指导策略,提供了一个系统的勘查思维。在接触性DNA中应特别小心避免二次接触的污染和转移。现场发现接触性的有效生物物证后,对其包装和运送同样会对接触性DNA的检测成功率产生巨大影响,因此现勘人员除了做必要防护措施,如戴口罩帽子手套,还要不轻易触碰此类检材,包装时更要小心轻柔,必要时分区域包装。
  1.2接触性DNA检材的前期处理及DNA提取
  1.2.1剪取法
  烟蒂、纸巾、口香糖、甘蔗渣、槟榔渣等这类脱落细胞相对量大的载体检材,可直接剪取适量放入EP管,例如,烟蒂可剪取过滤嘴的外层纸片大小约为1 mm ×5 mm,口香糖剪取1/2米粒大小;餐后擦嘴纸可剪取擦拭部位大小约5 mm ×5 mm{4}。类似剪取法的还有陈晓晖等{13}报道的割取法提取一次性牙刷上的脱落细胞进行STR分型效果良好,放置时间越长的牙刷,检出率越低。
  1.2.2擦拭法
  饮料瓶口、果核、电话,工具握柄等这类载体检材,可采用二步擦拭法{14}提取脱落细胞。Sukanya等{15}报道采用不同的拭子和湿润剂的组合,从胶带上脱落细胞中收集到DNA的量不同。 Jennifer等{16}研究了志愿者洗手2小时后用主手食指在无菌塑料板上按了指纹,使用尼龙植绒拭子和直接PCR获得完整的STR DNA图谱,且尼龙拭子优于海绵拭子,海绵优于棉签。
  1.2.3吸附法
  衣服、裤子,鞋子、帽子、手套等渗透性检材可采用吸附法提取脱落细胞。如衣服、裤子类载体,用脱落细胞提取仪充分在衣领、袖口、腋窝、裤头、口袋入口等直接接触人体皮肤处吸取,手套类载体,翻转后吸取内面的掌指部位,从脱落细胞提取仪上取下的三层滤膜分别用三个EP管处理。 Goray等{17}报道与非渗透性载体相比,皮肤脱落细胞更容易沉积在渗透性载体上,而且渗透性载体不易发生二次转移。邵武等{18}研究表明负压吸附法,因具有良好的脱落细胞富集能力从而提高脱落细胞检材的检验成功率。胡伟等{19}报道当载体受潮致人体脱落细胞浸润载体后,即使是吸尘器法也因无法吸附足够的人体脱落细胞而无法检测成功,而采用改良标准QIAamp DNA MiniKit法一次性过柱为反复多次过柱,能实现收集消化液中所有的DNA。
  1.2.4粘取法
  粘取法主要指利用胶带或粘取器粘取的方法,赵春鹤等{20}发明的粘取器成功收集到粘附在衣服袖口、剪刀柄、水杯、手表,手套、鞋带、拖鞋等20多份不同载体上的脱落细胞,并成功检验分型。Daly等{21}认为接触性DNA用小胶带粘取的收集检测成功率,在木质,纺织物,玻璃三种载体依次降低。巴华杰等{22}研究表明对表面积较大的检材,分区检验尤为重要,而采用先粘取表层,再吸取的方式,可以降低了背景DNA的影响,从而获得了单一DNA分型结果。田蕊等{23}研究显示EZ-Tape分区粘取法与真空负压吸引法相比,更有针对性,能够减少混STR峰型出现的几率。
  1.2.5单细胞显微捕获
  胡兰等{24}报道目前获取微量甚至单个细胞的方法主要有流式细胞仪分离法、激光捕获显微切割分离法、显微操作仪捕获法等。显微捕获技术的关键在于镜下上皮细胞和皮肤脱落细胞的准确区分。该技术的基础在于人体不同部位被覆的上皮细胞是有区别的,如口腔、食道和阴道等腔面与皮肤表皮,前三者被覆的是未角化的复层扁平上皮细胞,有胞核,且胞质内含角蛋白少;而后者浅表细胞为角化的复层扁平上皮,无细胞核,且胞质内充满角蛋白{25}。顾丽华等{26}利用激光捕获显微切割分离获得了7~8个细胞的成功分型。曾宪海等{27}采用激光显微切割技术、 PALM系统收集接触性检材上的目标细胞。但是此方法操作繁琐,仪器及技术要求更高,目前不能普遍应用于基层DNA实验室。
  1.2.6 DNA的提取
  成功

  ······

法宝用户,请登录后查看全部内容。
还不是用户?点击单篇购买;单位用户可在线填写“申请试用表”申请试用或直接致电400-810-8266成为法宝付费用户。
【注释】                                                                                                     
【参考文献】 {1}张广峰,陈松,涂政,等.接触DNA检验成功率的影响因素探讨[J].刑事技术,2013,(3):9-13.
  {2} Van Oorschot R A H, Jones M K.DNA Fingerprints from Finger prints[J]. Nature,1997,387:767.
  {3} Wickenheiser R A.Trace DNA: A Review, Discussion of Theory ,and Application of the Transfer of Trace Quantities of DNA through Skin Contact[J]. Forensic SCI,2002,(47):442-450.
  {4}李军,臧源云,韦亚尼,等.不同载体上脱落细胞的DNA检验在案件侦查中的应用[J].广西警官高等专科学校学报,2008,(S1):19-20.
  {5} Quinones I, Daniel B. Cell Free DNA as a Component of Forensic Evidence Recovered from Touched Surfaces [J]. Forensic Sci Int Genet,2012,6(1):26-30.
  {6} Gill P, Whitaker J.An Investigation of the Rigor of Interpretation RulesforSTRsDerivedfromlessthan 100 pgofDNA [J] Forensic Sci Int,2000,(112):17-40.
  {7} Caddy B, Taylor G R.A Review of the Science of Low Template DNA Analysis[EB/OL].(2008-04-12)[2016-01-20].http:// www.homeoffice.gov.uk/publications/police/790604.
  {8}陈松,胡兰.低拷贝模板STR分型及其存在的问题[J].中国法医学杂志,2003,18(5):314-316.
  {9} Gill P, Buckleton J.A Universal Strategy to Interpret DNA Profiles that does not Requirea Definition of Low Copy Number[J]. Forensic Sci Int Genet,2010,(4):221-227.
  {10}杨电,刘超,徐曲毅,等.茚三酮薰显法在人体接触细胞发现采集中的应用[J].中国司法鉴定,2012,(5):105-107.
  {11}蔡能斌,顾丽华,黄晓春,等.紫外激光探测对常见现场生物物证DNA检验的影响[J].影像技术,2011,(6):26-29.
  {12}张天祥,刘海东,邢立学,等.接触性DNA及其现场发现[J].法制与社会,2009,(9):352.
  {13}陈晓晖,刘超,陈玲,等.一次性牙刷上脱落细胞的DNA提取及STR分型[J].中国法医学杂志,2011,26(6):451-453.
  {14} Pang B C M, Cheung B K K.Double Swab Technique for Collecting Touched Evidence[J]. Legal Med,2007,(9):181-184.{15} SukanyaPhetpeng, Thitika Kitpipit, Vatee Asavutmangkul,et al. Touch DNA Collection from Improvised Explosive Devices: A Comprehensive Study of Swabs and Moistening Agents[J]. Forensic Science International:Genetics Supplement Series, 2013,(4):29-30.
  {16} Jennifer Templeton,Rene′e Ottens,Viviana Paradiso, et al. Genetic Profiling from Challenging Samples: Direct PCR of Touch DNA[J]. Forensic Science International: Genetics Supplement Series, 2013,(4):224-225.
  {17} Goray M, Mitchell R J, Van Oorschot R A. Investigation of Secondary DNA Transfer of Skin Cells under Controlled Test Conditions[J]. Leg Med, 2010,12(3):117-120.
  {18}邵武,姜先华,李秋阳,等.衣物载体上人体脱落细胞的负压吸附采集法[J].中国法医学杂志,2009,24(4):272-274.{19}胡伟,曹禹,蒋轶岩,等.大面积载体上隐性浸润性生物物质DNA的提取[J].法医学杂志,2009,25(6):459-460.{20}赵春鹤,郭业明,陈红英,等.利用脱落细胞粘取器提取接触类检材DNA的方法[J].广东公安科技,2013,(4):54-55.{21} Daly D J, Murphy C, McDermott S D.The Transfer of Touch DNA from Hands to Glass, Fabric and Wood [J].Forensic Sci Int Genet,2012,6(1):41-46.
  {22}巴华杰,李旭鹏.拖鞋上微量DNA检验策略初探[J].警察技术,2012,(2):13-15.
  {23}田蕊,班茂森.鞋内底不同部位接触DNA提取初探[J].刑事技术,2013,(2):50-52.
  {24}苏芹,李彩霞,胡兰,等.微量细胞DNA分型的法医学应用研究进展[J].证据科学,2008,16(4):480-486.
  {25}刘经平.组织学与胚胎学[M].江西:江西高校出版社,1994:24-26.
  {26}顾丽华,张晨,陈连康,等.激光显微捕获口腔上皮细胞的DNA分型[J].法医学杂志,2006,22(3):196-198.
  {27}曾宪海,李斌.激光显微切割技术与低体系扩增方法的法医学应用探索[J].刑事技术,2012,(5):3-5.
  {28}牛青山,潘永峰,陈晶,等.应用免疫胶体金技术提取微量生物检材DNA的研究[J].中国刑警学院学报,2011,(3):43-44.
  {29}杨电,刘超,徐曲毅,等.微量口腔脱落细胞检材的DNA检验[J].法医学杂志,2008,24(2):126-128.
  {30}姚建,贾东涛,张玉红,等.检材量对硅珠法提取脱落细胞DNA的影响[J].中国法医学杂志,2009,24(5):333-334.
  {31} Sewell J, Quinones I, Ames C, etal. Recovery of DNA and Finger prints from Touched Documents[J]. Forensic Sci Int Genet,2008,2(4):281-285.
  {32}杨电,刘超,徐曲毅,等.人体接触检材前处理方式对磁珠法提取DNA效果的影响[J].中国法医学杂志,2011,26(5):393-396.
  {33}刘海渤,冯保强,黄颖,等.3种提取接触性检材脱落表皮细胞DNA方法的实验研究[J].昆明医科大学学报,2012,(12):36-40.
  {34}杨电.接触DNA检材提取纯化方法的比较及法医学应用[D].广东:南方医科大学,2010.
  {35}杨电,刘超,徐曲毅,等.DNA IQ磁珠法结合MaxwellTM16自动仪提取接触DNA[J].刑事技术,2011,(3):3-5.
  {36} Sangeeta Aditya, A K Sharma. Generating STR Profile from “Touch DNA”[J]. Journal of Forensic and Legal Medicine,2011,(18):295-298.
  {37} Luke Forster, Jim Thomson, Stefan Kutranov.Direct Comparison of Post -28 -Cycle PCR Purification and Modified Capillary Electrophoresis Methods with the 34 -Cycle “low copy number”(LCN) Method for Analysis of Trace Forensic DNA Samples[J]. Forensic Science International:Genetics,2008,(2):318-328.
  {38} John M Butler.法医DNA 分型专论:方法学[M].第3 版.侯一平,李成涛,译.北京:科学出版社,2013:273-285.
  {39} Seung Bum Seo, Jianye Ge, Jonathan L King, et al. Reduction of Stutter Ratios in Short Tandem Repeat Loci Typing of Low Copy Number DNA Samples [J]. Forensic Science International Genetics,2014,(8):213-218.
  {40} 毛坤云,周建清,顾西蒙,等.载体法检验微量检材DNA[J].法医学杂志,2008,24(6):439-441.
  {41} 李长征,刘海东.直扩试剂盒检验接触DNA 检材初探[J].中国法医学杂志, 2013,(3):247-248.
  {42} Lasken,Egholm.Advanced Topics in Forensic DNA Typing[J].Methodology, 2003,(2):146-147.
  {43} Sangeeta Aditya A.K. SharmaGenerating STR profile from “Touch DNA” [J]. Journal of Forensic and Legal Medicine, 2011, (18):295-298.
©北大法宝:(www.pkulaw.cn)专业提供法律信息、法学知识和法律软件领域各类解决方案。北大法宝为您提供丰富的参考资料,正式引用法规条文时请与标准文本核对
欢迎查看所有产品和服务。法宝快讯:如何快速找到您需要的检索结果?    法宝V5有何新特色?
本篇【法宝引证码CLI.A.1216823      关注法宝动态:  

法宝联想
【相似文献】

热门视频更多