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【期刊名称】 《四川警察学院学报》
三种痕迹显现方法对唾液斑DNA检测影响
【英文标题】 Effect of Three Methods of Trace Showing on Saliva Spot DNA Test
【作者】 龙兵罗杨皮建华
【作者单位】 四川警察学院泸州市公安局四川警察学院
【分类】 司法鉴定学【中文关键词】 DNA;痕迹显现;唾液斑;熏显;茚三酮
【英文关键词】 DNA; Trace Showing; Saliva Spot; Iodine Smoking; Ninhydrin
【文章编码】 1674-5612(2016)03-0054-03【文献标识码】 A
【期刊年份】 2016年【期号】 3
【页码】 54
【摘要】

目的:该研究以唾液斑为研究对象,研究碘熏、茚三酮和“502”熏显等三种痕迹显现方法对唾液斑生物检材DNA检测的影响,同时探讨该三种方法在唾液斑生物检材发现上的作用。方法:分别采用碘熏、茚三酮和“502”熏显法处理烧杯口唾液斑,采用棉签擦拭法采集烧杯口唾液斑DNA,采用chelex法提取DNA, Identifiler Kit试剂盒进行PCR扩增,3130基因分析仪进行扩增产物分型。结果与讨论:“502”熏显、碘熏对唾液斑DNA检测无明显影响,且“502”熏显在唾液斑生物检材发现上具有应用价值。茚三酮喷显对唾液斑DNA检测影响大,经茚三酮喷显处理的唾液斑难以进行有效DNA检测。

【英文摘要】

Objective: the research aims to study the effect of three methods of trace showing, including Iodine smoking, ninhydrin and “502”, on saliva spot DNA test, and discuss the application of the three methods in the detection of saliva spot. Methods: the saliva spots leaving on the edge of beaker were deal with the three trace showing methods respectively, and then collected by cotton swabs. DNA was extracted by chelex method and PCR by Identifiler Kit. Finally the PCR products were detected by 3130 Gene Analyzer. Results and Conclusions: “502” and Iodine somking have no effect on the test of DNA on saliva spot and “502” is useful in the detection of saliva spot. Ninhydrin have significantly negative effect on DNA test.

【全文】法宝引证码CLI.A.1218474    
随着刑事科学技术的快速发展,同一物证上经常含有多种有价值的信息。比如,嫌疑人作案使用的凶器可能含有嫌疑人的指纹,同时也可能会含有嫌疑人在接触凶器时留下可用于DNA检测的脱落细胞。当我们对其进行痕迹显现时就会面临显现方法是否会影响DNA检测的问题。同时,痕迹显现方法在现场勘验、物证检验中应用十分广泛,难免会污染相关物证。这些显现方法对生物检材DNA分析的影响是我们在DNA检测分析时所必须考虑的。
  也有学者研究一些痕迹显现处理方法在生物检材发现上的应用。杨电{1}等,在研究中采用茚三酮薰显法来寻找肉眼不能发现的人体接触细胞。痕迹显现方法是否会影响DNA分析,是我们将痕迹显现方法应用于生物检材发现的前提。目前关于这方面的研究还比较少,研究大多集中于痕迹显现对指印DNA检测的影响,对唾液斑的影响还未见相关报道。本研究以唾液斑为研究对象,探讨碘熏、茚三酮和“502”熏显法对唾液斑生物检材DNA检测的影响。
  一、材料与方法
  (一)材料。
  碘、茚三酮显现试剂、“502”、chelex-100、Identifiler Kit试剂盒、9700型PCR扩增仪(AB公司,美国)、3130型基因分析仪(AB公司,美国)等。
  (二)实验方法。
  1.检材制备同一个体嘴唇接触烧杯杯口边缘留下唾液斑(接触时间为5秒:),共制作24份检材。将制作的检材随机分为四组——对照组、碘熏组、茚三酮组和“502”熏显组,每组6份检材。对照组未经任何显现处理,碘熏组碘熏时间为2分钟;茚三酮组采用2%茚三酮溶液喷显,“502”熏显组熏显时间为5分钟。同时采集该个体口腔拭子作为比对样本。
  2. DNA提取。米用棉签反复擦拭烧杯杯口,尽量完全转移唾液斑。采用chelex法提取DNA[2J。
  3. PCR扩增。对提取的DNA采用Identifier Kit试剂盒进行PCR扩增(16个基因座:)。采用AB-9700PCR扩增仪扩增,扩增体系为l0ul。反应条件为95℃预变性llmin, 94℃变性lmin, 59℃退火lmin, 72℃延伸1min,共进行28个循环。
  4.毛细管电泳。扩增产物采用AB-3130基因自动分析仪进行分型。应用ABI-PRISM 3130 Data Collection Software3.1收集数据,Genemapper 3.2软件对电泳结果进行分析。
  二、结果
  结果显示对照组有5个检材成功获得12个以上基因分型;碘熏组有4个检材获得11个以上基因分型;茚三酮组只有1个检材获得6个基因分型,其余均未获得分型;“502”熏显组5个检材成功获得13个以上基因分型(见图1)。各组检材DNA分型具体结果见表1.


  ······

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【注释】                                                                                                     
【参考文献】

{1}杨电,刘超,徐曲毅,等.茚三酮薰显法在人体接触细胞发现采集中的应用[J].中国司法鉴定,2012, (5):105-107.

{2}Walsh BS, PetzgerDA, Higuchi R. Chelex—100 as medium for simple extraction of DNA for PCR—based typing from forensic material[J]. Biotechniques, 1991, 10:506—510.

{3}郝金萍,邵丽芳,朴相杰,等.茚三酮显现汗潜指印的三种操作方法对DNA检测的影响[J].刑事技术,2013, (2;):35-37.谁敢欺负我的人

{4}赖跃,王传海,秦洁,等.8种方法显现的汗潜指印STR分型研究[J].中国法医学杂志,2007,22(6):366-368.

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